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副溶血弧菌測試片

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1、原理及適用范圍 
      副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細(xì)菌，海產(chǎn)品中常有此菌，它是引起食源性疾病的主要病原之一，是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)統(tǒng)計，我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢，已成為我國一個嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為：上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等，腹瀉多為水樣便，亦有大便膿血，隨后腹部劇烈疼痛，持續(xù)1～2天。

     副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分，培養(yǎng)15～24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在，大大地簡化了檢測程序，更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗部門和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測。 參照標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗副溶血性弧菌檢驗（GB/T 4789.7-2008）。
 
2、操作方法 
2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液。 
2.2、接種：將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養(yǎng)基凝固。每個樣品接種兩片，同時做一片空白陰性對照。 
2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。 
 
3、結(jié)果判讀 
呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測試片上不生長，少數(shù)能生長，如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌，但菌落呈藍(lán)色，明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽性菌落的樣本，zui好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗一次。 
4、報告方式 
在25g（或25ml）樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。 
 
5、附加說明 
5.1、根據(jù)出入境檢驗檢疫局技術(shù)中心所做的對比試驗結(jié)果表明，副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性，對純菌的檢測靈敏度達(dá)到8cfu/mL，與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（SN）方法符合率達(dá)到90%以上（中國衛(wèi)生檢驗雜志2008，18（12）：2621-2623）。 
5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
 
6、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，zui好在拆封前將整包回溫至室溫。
1、原理及適用范圍 
      副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細(xì)菌，海產(chǎn)品中常有此菌，它是引起食源性疾病的主要病原之一，是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國家食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)統(tǒng)計，我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢，已成為我國一個嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為：上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等，腹瀉多為水樣便，亦有大便膿血，隨后腹部劇烈疼痛，持續(xù)1～2天。

     副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分，培養(yǎng)15～24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在，大大地簡化了檢測程序，更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗部門和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測。 參照標(biāo)準(zhǔn)：食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗副溶血性弧菌檢驗（GB/T 4789.7-2008）。
 
2、操作方法 
2.1、樣品處理：取樣品25mL（g）放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液。 
2.2、接種：將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置10s左右，使培養(yǎng)基凝固。每個樣品接種兩片，同時做一片空白陰性對照。 
2.3、培養(yǎng)：將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。 
 
3、結(jié)果判讀 
呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測試片上不生長，少數(shù)能生長，如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌，但菌落呈藍(lán)色，明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽性菌落的樣本，zui好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗證，沒有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗一次。 
4、報告方式 
在25g（或25ml）樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。 
 
5、附加說明 
5.1、根據(jù)出入境檢驗檢疫局技術(shù)中心所做的對比試驗結(jié)果表明，副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性，對純菌的檢測靈敏度達(dá)到8cfu/mL，與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（SN）方法符合率達(dá)到90%以上（中國衛(wèi)生檢驗雜志2008，18（12）：2621-2623）。 
5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
 
6、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質(zhì)期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水，zui好在拆封前將整包回溫至室溫。

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